赛默飞2720PCR仪为什么3次循环才能得到目的基因？

　　赛默飞2720PCR仪是一种在DNA扩增反应中，以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应（PCR）循环后产物总量的方法。通过内参对待测样品中的特定DNA序列进行定量分析的方法。

 

　　数字PCR是近年来迅速发展起来的一种定量分析技术。该技术结果判定不依赖于扩增曲线的循环阈值（Ct），不受扩增效率的影响，具有很好的准确度和重现性，并且可以实现定量分析。数字PCR已经在核酸检测、鉴定等研究领域显示出巨大的技术优势和应用前景。

 

　　定量PCR是依靠标准曲线或参照基因来测定核酸量，而数字PCR则让你能够直接数出DNA分子的个数，是对起始样品的定量。因此特别适用于依靠Ct值不能很好分辨的应用领域：拷贝数变异、突变检测、基因相对表达研究（如等位基因不平衡表达）、二代测序结果验证、miRNA表达分析、单细胞基因表达分析等。

 

　　赛默飞2720PCR仪技术中为什么3次循环才能得到目的基因？

 

　　1、第1个循环扩增出来的新片段很长很长。

 

　　2、第2个循环以新的长片段为模板进行，但新片段的一端是引物开头的，所以第2个循环得到的片段就是我们需要的长度，但只是一条链，所以还不能分离出目的基因。

 

　　3、第3个循环，当以第2个循环得到的新片段为模板时，因为这个片段的长度就是需要扩增的长度，当第三个循环完成时，这个片段是需要的长度，且是双链DNA，这就得到了需要的目的基因了。